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FITC-α-酮戊二酸,异硫氰酸标记TCA循环调控中间体

中文名称:异硫氰酸荧光素标记α-酮戊二酸
英文名称:FITC-α-Ketoglutaric AcidFITC-α-KG


一、定义与化学本质


FITC-α-酮戊二酸是一种将荧光素异硫氰酸酯(FITC)与三羧酸循环(TCA循环)关键中间体α-酮戊二酸(α-KG)通过共价键结合的荧光探针。α-KG是细胞能量代谢的核心分子,参与氨基酸合成、表观遗传调控及氮平衡;而FITC作为经典荧光染料,赋予其绿色荧光特性,使其成为追踪代谢流的“分子显微镜”。


二、荧光特性与可视化优势


该探针在激发波长495 nm、发射波长525 nm下呈现明亮绿色荧光,可在荧光显微镜、流式细胞仪等设备中实现高灵敏度检测。其荧光稳定性强,在pH 7.0-8.0的生理环境中可持续数小时,支持长时间动态观测。相较于传统放射性标记或质谱分析,FITC-α-KG无需复杂前处理,可直接在活细胞或组织切片中实时成像,显著降低实验成本与操作难度。


三、应用领域与科研价值


代谢流追踪:通过监测荧光信号变化,揭示细胞在缺氧、药物刺激等条件下的能量代谢途径切换,为癌症代谢重编程研究提供关键工具。

酶活性分析:作为谷氨酸脱氢酶、脯氨酰羟化酶等依赖α-KG的酶反应底物,定量分析酶促反应速率。

分子相互作用研究:追踪α-KGTET双加氧酶、Jumonji C结构域去甲基化酶等表观遗传调控因子的结合过程,解析DNA去甲基化机制。

疾病模型研究:在神经退行性疾病、代谢综合征模型中,观察α-KG代谢异常与病理进程的关联。


四、结构特点与合成工艺


FITC-α-KG由α-KG的羧基与FITC的异硫氰酸基团通过亲核取代反应形成硫脲键,产物经凝胶过滤色谱纯化,去除未反应染料,确保纯度≥95%。其水溶性优异(20℃时溶解度>1000 g/L),兼容细胞培养、组织灌注等多种实验体系。

五、市场优势与用户价值

相较于CY5等近红外荧光探针,FITC-α-KG在常规实验室设备中即可实现高效检测,成本降低约40%。其非侵入性标记方式避免了对代谢通路的干扰,数据可靠性更高。目前,该产品已广泛应用于全球顶尖实验室,成为代谢组学研究的“标准配置”。


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