为华生物┃DOTAP:经典体外细胞转染阳离子脂质
简要定义:
DOTAP(1,2 - 二油酰基 - 3 - 三甲基铵丙烷,CAS:132172-61-3)是一种永久阳离子脂质,通过与核酸的静电相互作用,构建高效、稳定的体外核酸递送系统。
核心特点:
分子由两条油酸不饱和疏水尾链和带永久正电荷的季铵阳离子头基组成,具有强两亲性。在生理及酸性环境下均带正电,可与带负电的 mRNA、siRNA、质粒 DNA 等核酸分子通过静电作用形成稳定的脂质 - 核酸复合物(lipoplex),保护核酸免受酶降解。双不饱和脂肪链赋予脂质体高膜流动性,促进与细胞膜融合,提高细胞摄取效率。与可电离脂质不同,DOTAP 无 pH 响应性,电荷稳定性强,操作简便,适合体外实验场景。
重点应用:
作为体外细胞转染的经典试剂,DOTAP 广泛用于哺乳动物细胞的基因递送,包括质粒 DNA 转染、siRNA 沉默、mRNA 表达等实验。在基因编辑研究中,介导 CRISPR-Cas9 系统的递送,实现靶基因的高效编辑,为细胞工程与基因治疗提供基础工具。此外,可用于体外疫苗研发,通过转染抗原编码 DNA,在细胞内表达抗原,制备细胞源性疫苗,增强免疫原性。同时,可与其他脂质组合,构建阳离子脂质体,用于小分子药物的体外递送,拓展其应用范围。
实际使用场景举例:
在细胞培养实验中,研究者使用 DOTAP 转染质粒 DNA,在 HEK293、CHO 等细胞中高效表达重组蛋白,用于抗体、酶类药物的生产。在基因功能研究中,通过 DOTAP 递送 siRNA,沉默特定基因,观察细胞表型变化,解析基因功能。此外,在干细胞研究中,DOTAP 介导重编程因子 mRNA 的转染,实现体细胞向诱导多能干细胞(iPSC)的重编程,为再生医学提供细胞来源。
总结:
DOTAP 以其高效的体外转染效率、稳定的电荷特性与简便的操作流程,成为分子生物学与细胞生物学实验的必备试剂。适合体外细胞转染、基因功能研究、干细胞重编程等实验场景,是核酸递送体外研究的核心脂质。
本产品仅面向科学研究使用,任何情况下均不得用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研活动。
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