TCO-PEG-FITC，反式环辛烯-聚乙二醇-荧光素，TCO-聚乙二醇-异硫氰酸，荧光素-聚乙二醇-反式环辛烯
TCO-PEG-FITC是一种基于生物正交化学的荧光标记试剂，中文名反式环辛烯聚乙二醇荧光素，英文缩写TCO-PEG-Fluorescein。其核心结构为TCO（反式环辛烯）、PEG（聚乙二醇）与FITC（异硫氰酸荧光素）的线性组合，分子量范围从400至10,000 Da可定制。
化学结构解析
· TCO模块：含8元环烯烃结构，作为反应“钩子”，特异性捕获四嗪基团，实现快速共价结合；
· PEG间隔臂：通过调节链长（如PEG3、PEG5）控制分子柔性与空间位阻，优化标记效率；
· FITC发光体：异硫氰酸基团与生物分子共价连接后，发射黄绿色荧光，信号强度是传统染料的2-3倍。
生理功能与作用
1. 无创示踪：
· 在活体模型中，TCO-PEG-FITC标记的细胞或药物可通过荧光成像系统（如IVIS）实时监测分布，助力肿瘤代谢研究。
· 例如，标记干细胞后，观察其在损伤组织中的归巢与分化过程。
2. 高特异性标记：
· TCO-四嗪反应的速率常数（k>10⁵ M⁻¹s⁻¹）远高于传统生物偶联方法，减少非特异性结合，适用于低丰度靶点检测。
实验应用场景
· 蛋白质组学：
将TCO-PEG-FITC与NHS酯活化剂联用，标记血清中的疾病标志物，通过荧光Western blot定量分析。
· 纳米药物开发：
在脂质体表面修饰TCO基团，与FITC-四嗪探针反应，构建荧光纳米载体，追踪药物释放动力学。
· 单细胞分析：
结合微流控芯片技术，利用TCO-PEG-FITC对单个细胞进行荧光编码，实现高通量分选。
开发挑战与前景
· 光稳定性优化：FITC在长时间激发下易发生光漂白，需通过PEG链保护或开发衍生物（如TCO-PEG-Cy5）提升信号持久性。
· 多模态成像：
未来可能集成磁共振（MRI）或正电子发射（PET）功能基团，构建“荧光-放射”双模态探针，提升诊断精度。
产品形态
市售产品包括固体粉末（低分子量PEG）与粘性液体（高分子量PEG），溶解于DMSO或PBS，配套提供四嗪修饰的二抗或纳米颗粒，简化实验流程。
