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CY5.5-链霉亲和素,CY5.5-Streptavidin五甲川花箐荧光染料系列标记链霉菌蛋白化合产物

CY5.5-链霉亲和素(CY5.5-Streptavidin)是一种生物共轭复合物,由近红外荧光染料CY5.5与链霉亲和素蛋白通过化学键结合而成。其中文常称为“CY5.5-标记链霉亲和素”,英文别名包括“Streptavidin, Cy5.5-conjugated”。链霉亲和素来源于链霉菌(Streptomyces avidinit),是一种同源四聚体蛋白,每个亚基均可高亲和力结合生物素(亲和常数Ka≈10^14 M^-1)。CY5.5则属于花菁素类染料,其化学名称为“Cyanine5.5”,分子结构中包含共轭多甲川链与芳香环系统,赋予其近红外荧光特性。

结构特性
从分子结构看,CY5.5染料通常通过活性基团(如N-羟基琥珀酰亚胺酯)与链霉亲和素蛋白表面的赖氨酸残基氨基共价连接,形成稳定的酰胺键。链霉亲和素四聚体结构呈桶状,每个亚基含一个生物素结合口袋,使一个CY5.5-链霉亲和素分子最多可结合四个生物素化分子。CY5.5的发射波长约694 nm,激发波长约673 nm,恰好处于生物组织透射窗口(650-900 nm),能显著降低背景荧光干扰。

物化特性与功能应用
该复合物兼具链霉亲和素的高特异性结合能力与CY5.5的优异光学性能:摩尔吸光系数高达~190,000 L·mol^-1·cm^-1,荧光量子产率适中(约0.3),斯托克斯位移约20 nm。其核心功能是作为“信号放大器”用于生物检测体系,通过生物素-链霉亲和素级联放大原理,将CY5.5荧光信号锚定至目标分子。
在具体应用中,需注意优化使用浓度(常为0.1-10 μg/mL)以平衡信噪比与非特异性吸附。例如在Western blot实验中,生物素化二抗与膜上靶蛋白结合后,滴加CY5.5-链霉亲和素孵育30分钟,经缓冲液洗涤即可通过近红外成像系统检测。该策略灵敏度较传统显色法提升10-100倍,且支持多色荧光复染(如与CY3标记抗体联用)。
开发领域聚焦于活体成像与多重检测:在肿瘤靶向实验中,先向小鼠注射生物素化抗体,再注入CY5.5-链霉亲和素实现“预定位”增强成像对比度;在液相芯片技术中,其与不同编码微球偶联可同步检测数十种生物标志物。


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