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CY2-溶菌酶,CY2-Lysozyme,花箐染料标记关键

CY2 - 溶菌酶是将可见光荧光染料 CY2 与天然抗菌蛋白溶菌酶通过共价偶联形成的功能性复合物,既能保留溶菌酶高效的抑菌活性,又借助 CY2 的荧光特性实现动态追踪,在食品防腐检测、生物医学研究等领域极具应用价值。要深入了解这一产品,需从核心成分溶菌酶的本质、制备方式、理化特性,以及与 CY2 的分子链接逻辑展开。


溶菌酶并非合成化合物,而是一种广泛存在于自然界的碱性球蛋白,属于糖苷水解酶家族。它的分子结构由 129 个氨基酸残基组成,形成紧密的球状空间构象,活性中心含谷氨酸和天冬氨酸,这两个氨基酸是其发挥抑菌作用的关键 —— 能特异性水解细菌细胞壁中肽聚糖的 β-1,4 糖苷键,导致细胞壁破裂、内容物泄漏,最终使细菌裂解死亡,对革兰氏阳性菌(如金黄色葡萄球菌)抑制效果尤为显著。


溶菌酶的制备主要依赖天然提取与生物工程技术。传统方法从鸡蛋清中提取:将鸡蛋清经离心去除杂质,用硫酸铵盐析法沉淀蛋白质,再通过离子交换层析、凝胶过滤层析分离纯化,获得高纯度溶菌酶;随着生物工程发展,现在也可通过基因工程技术,将溶菌酶基因导入大肠杆菌、酵母菌等宿主细胞,经发酵培养、蛋白表达与纯化,实现大规模生产,这种方式成本更低、产量更高,且能根据需求对酶分子进行修饰。


从理化特性来看,溶菌酶稳定性优异:最适 pH 值为 6.0-7.5,在中性至弱碱性环境中活性稳定,高温(80℃以下)处理后仍能保留部分活性;溶解性好,易溶于水,不溶于丙酮、乙醚等有机溶剂;分子质量约 14.3 kDa,无毒性、无致敏性,生物相容性极佳,这也是其能广泛应用于食品、医药领域的重要原因。


CY2 与溶菌酶的分子链接需精准匹配反应位点。CY2 常用活性形式为 CY2-NHS 酯,分子含琥珀酰亚胺酯活性基团;而溶菌酶分子的赖氨酸残基侧链含伯氨基(-NH₂),这是理想的偶联位点。在中性缓冲液(pH 7.2-7.4)中,CY2-NHS 酯的活性酯基团与溶菌酶的氨基发生亲核取代反应,琥珀酰亚胺作为离去基团脱离,最终形成稳定的酰胺键(-CO-NH-),将 CY2 荧光基团共价连接到溶菌酶分子上。整个过程温和可控,不会破坏溶菌酶的活性中心与空间构象,确保复合物既保留抑菌能力,又具备荧光追踪功能,可用于观察溶菌酶在细菌表面的结合过程、细胞内的分布情况,为相关研究提供直观的可视化工具。


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