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为华课堂:L - 苯丙氨酸 - 13C6/13C 标记苯丙氨酸 / 全碳六同位素苯丙氨酸 / SILAC 示踪氨基酸

一、同位素标记分子基础

该物质属于稳定同位素标记氨基酸,母体为天然 L - 苯丙氨酸,苯环上 6 个碳原子全部替换为 ¹³C 稳定同位素,氨基、羧基、侧链亚甲基碳保持天然碳同位素,分子整体化学结构、空间手性与普通苯丙氨酸完全一致,不具备放射性,无辐射相关操作风险。成品为白色结晶粉末,水溶性良好,可直接溶于纯水缓冲体系。

同位素标记带来固定分子量偏移,质谱检测时可与未标记天然氨基酸形成清晰质量差,区分效果稳定。苯环六碳全标记设计,相比单碳标记拥有更大分子量差值,降低生物样品中杂质质谱峰重叠干扰,适配复杂代谢样本分析。手性构型严格保持 L 型,可正常被生物细胞摄取、参与多肽、蛋白质合成,代谢通路与天然苯丙氨酸无差异。

二、同位素示踪核心作用原理

生物细胞吸收该标记氨基酸后,会将其整合至新合成多肽与蛋白质分子中,¹³C 同位素会随代谢通路进入下游代谢产物。质谱检测设备可通过特征质量峰,区分含标记同位素的新生分子与原有未标记分子,以此追踪细胞内蛋白合成速率、氨基酸代谢流向。

稳定同位素不会自发衰变,实验全程信号稳定,可开展长时间梯度示踪实验;无放射性污染,实验废弃物处理流程简单,实验室操作门槛更低。同等实验条件下,全苯环标记结构质谱响应信号区分度更高,定量检测误差更小,适配低丰度代谢物分析。

三、主流科研应用领域

第一类为 SILAC 定量蛋白组学实验,作为细胞培养基添加组分,标记实验组细胞蛋白,与未标记对照组混合上机,实现细胞内蛋白表达丰度对比,解析外界刺激下蛋白表达变化规律。

第二类为代谢流分析研究,供给微生物、细胞模型,追踪苯丙氨酸分解、芳香族代谢产物合成路径,解析氨基酸代谢调控网络,用于合成生物学菌种改造研究。

第三类为质谱定量内标开发,配置梯度浓度标准溶液,校正生物样本前处理、离子抑制带来的检测偏差,提升氨基酸、多肽定量检测重复性。

四、储存与操作基础规范

粉末需密封低温避光保存,避免同位素丰度因杂质污染下降;配制水溶液现配现用,缓冲液 pH 维持中性区间,防止氨基酸消旋改变手性;细胞培养添加时,培养基原有普通苯丙氨酸需完全去除,避免未标记分子稀释同位素信号,影响检测结果。

本产品仅面向科学研究使用,任何情况下均不得用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研活动。

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