DBCO-BSA，二苯环辛炔-牛血清白蛋白，二苯环辛炔-BSA，DBCO-牛血清白蛋白，BSA-二苯环辛炔
DBCO-BSA是一种工程化蛋白偶联物，其化学本质是牛血清白蛋白（BSA）共价修饰二苯并环辛炔（Dibenzocyclooctyne）官能团后的衍生物。在文献中，它也被称为“BSA-DBCO conjugate”或“albumin-DBCO hybrid”，属于生物偶联化学中的预功能化载体蛋白。
结构属性与分子特征
该复合物呈现“核心-表面”分级结构：BSA的核心三级结构（以α-螺旋为主）维持蛋白稳定性，而表面分布的DBCO基团（通过N-羟基琥珀酰亚胺酯反应连接至赖氨酸ε-氨基）构成反应界面。每个BSA分子含有59个赖氨酸位点，实际修饰数可通过质谱定量控制（通常3-8个DBCO/BSA）。物理化学特性方面，DBCO-BSA的等电点较天然BSA略有降低（从4.7降至4.3-4.5），且疏水性增加，可通过疏水相互作用色谱纯化。其紫外吸收在309 nm处出现DBCO特征峰，可作为定量依据。
应用场景与实验设计
DBCO-BSA的核心优势在于创建多价生物界面。在生物传感器开发中，将DBCO-BSA固定于金电极表面，可高效捕获叠氮修饰的核酸适体，构建无酶电化学传感平台。例如，检测癌胚抗原时，灵敏度可达0.1 pg/mL。在显微成像领域，DBCO-BSA可作为“预涂层层”，通过SPAAC将叠氮荧光染料定向偶联至细胞膜模拟表面，实现超分辨率成像的样品制备。此外，在组织工程中，DBCO-BSA与叠氮化海藻酸钠协同，可形成点击化学交联的水凝胶支架。
操作理论与开发前沿
实验中使用DBCO-BSA需严格控制摩尔比：叠氮化目标物与DBCO基团的投料比建议为1.2:1，以补偿反应不完全。反应体系需排除含氨基的缓冲液（如Tris），以免竞争连接位点。理论研究表明，DBCO-BSA的多价效应可增强弱亲和力配体的结合能力（亲和力提升达百倍），这为低丰度生物标志物检测提供了新策略。当前开发聚焦于构建“智能型”变体，如pH响应型DBCO-BSA（通过可裂解连接子实现可控释放），以及用于体内靶向的PEG化DBCO-BSA以延长半衰期。
