FITC-菊粉,异硫氰酸标记酯菊粉,荧光标记促进药性作用和功能的研究
中英文名称:中文名称为 FITC - 菊粉,也叫荧光素异硫氰酸酯菊粉;
英文名称: FITC-inulin 或 Fluorescein Isothiocyanate-Inulin。
化学、物理、生物功能
化学功能:FITC - 菊粉是通过 FITC 的异硫氰酸基团与菊粉分子上的羟基共价结合形成的复合物。这种共价结合使得 FITC - 菊粉在一定条件下具有相对稳定的化学结构,同时保留了 FITC 的荧光特性和菊粉的部分化学活性。
物理功能:通常为固体或粉末状,颜色可能为白色、类白色或黄色。易溶于水、DMSO、甲酰胺等极性溶剂,不溶于低级脂肪醇、丙酮、氯仿等有机溶剂。其激发最大值为 490-495nm,发射最大值为 520±5nm,能发出明亮的绿色荧光。
生物功能:菊粉本身具有良好的生物相容性,FITC - 菊粉继承了这一特性,在生物体内不易引起免疫反应等不良反应。它可以作为一种荧光标记物,用于追踪生物体内菊粉的分布和代谢情况等。
在研究中的作用和功能
肾小球滤过率(GFR)评估:菊粉能完全被肾小球过滤,不会被小管分泌或重新吸收,是测量 GFR 的金标准。FITC - 菊粉可通过荧光检测其在血液和尿液中的分布变化,实时测定 GFR,实现对肾功能的精准监测,适用于肾病模型及药物毒性研究。
细胞生物学研究:可用于追踪菊粉在细胞内的分布和代谢路径,观察细胞表面蛋白或胞内分子的定位和动态变化,还可用于标记细胞,检测细胞表面抗原的表达水平。
药物递送载体研究:利用菊粉的溶解性和生物相容性,FITC - 菊粉可作为药物递送载体,增强药物在特定细胞或组织中的递送效率,研究药物在体内的传递和作用机制。
制备方法
菊粉改性:先通过氨基化反应等方法对菊粉进行部分改性,在菊粉分子上引入活性氨基基团,以增强其反应活性。
FITC 偶联:在碱性缓冲液中加入 FITC,使 FITC 的异硫氰酸酯基团与菊粉分子上的氨基通过化学反应共价结合,反应数小时。
纯化分离:反应完成后,利用透析或层析等方法去除未反应的 FITC 及副产物,得到纯净的 FITC - 菊粉。
冻干制备:对纯化后的 FITC - 菊粉溶液进行冻干处理,得到稳定的 FITC - 菊粉粉末。
应用使用过程中的作用及反应原理
作用:主要是利用其荧光特性,在荧光显微镜、流式细胞术、活体荧光成像系统等技术的支持下,实现对生物体内物质的追踪、检测以及对生理过程的监测等。
反应原理:FITC - 菊粉中的 FITC 在特定波长的激发光(490-495nm)照射下,其分子中的电子会从基态跃迁到激发态,处于激发态的电子不稳定,会迅速回到基态,并以发射荧光的形式释放出能量,发射光的波长为 520±5nm,通过检测这种荧光信号,就可以实现对 FITC - 菊粉的追踪和检测。



