S2P肽-聚乙二醇-羧基，S2P-PEG-COOH，材料共价构建方法

材料构建方法

S2P肽、PEG与羧基的连接通过共价键合成实现，具体步骤如下：

PEG活化：

选用甲氧基聚乙二醇（mPEG-COOH，分子量2000 Da），通过碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化羧基，生成活性酯中间体。

S2P肽偶联：

S2P肽的N端氨基与活化PEG的羧基发生酰胺化反应，形成PEG-S2P连接体。

反应条件：pH 7.4的磷酸盐缓冲液（PBS），25℃下反应4小时，产率可达85%以上。

羧基修饰：

在PEG另一端引入羧基，可通过以下两种方式：

直接合成：选用羧基端基的PEG（HOOC-PEG-COOH），一端连接S2P肽，另一端保留羧基。

后修饰：在PEG-S2P的PEG末端通过琥珀酸酐开环反应引入羧基。

纯化与表征：

通过高效液相色谱（HPLC）去除未反应原料，质谱（MS）验证分子量（约3000 Da）。

动态光散射（DLS）检测纳米颗粒粒径（100-150 nm），Zeta电位（-20至-30 mV）确认稳定性。

四、应用领域与优势

靶向药物递送：

负载化疗药物（如顺铂）或抗炎分子（如RvD1），通过S2P肽靶向递送至动脉粥样硬化斑块，减少全身毒性。

示例：S2P-PEG-脂质体装载他汀类药物，使斑块药物浓度提升4倍，疗效显著优于游离药物。

基因治疗：

复合物可压缩siRNA或mRNA形成纳米粒，通过S2P肽介导的内吞作用实现细胞转染。

示例：针对CaMKIIγ基因的siRNA-S2P-PEG纳米粒，在ApoE-/-小鼠模型中使斑块坏死核心缩小50%。

分子成像：

羧基端可连接荧光染料（如Cy5.5）或磁性颗粒，实现病变部位的可视化追踪。

示例：S2P-PEG-Cy5.5纳米粒在近红外二区（NIR-II）荧光成像中，斑块信号强度比游离染料高8倍。

优势总结：

精准靶向：Stabilin-2受体特异性结合，减少脱靶效应。

高稳定性：环状肽结构抗酶解，PEG层延长循环时间。

模块化设计：羧基端支持多功能修饰，适应不同治疗需求。